談乳絡通膠囊的鎮痛抗炎及改善微循環作用的論文
中醫認為乳腺增生主要為肝郁氣滯，痰瘀瘟結于經絡，從而形成" 乳癖" ，相當于現代醫學的乳房纖維性瘤，乳腺囊性，臨床癥狀主要為乳房出現腫塊，疼痛等。乳絡通主要有香附、丹參、柴胡、白芍、栝樓、路路通6 味藥組成，本文采用急慢性炎癥動物模型和疼痛模型評價了乳絡通的抗炎、鎮痛及改善微循環作用，旨在為其治療乳腺增生提供藥效學依據。
1 材料和方法
1. 1 試驗藥物乳絡通膠囊( 乳絡通) ，由河南中醫學院第一附屬醫院制劑室提供，批號050901，規格: 0. 2g /粒，用量: 每次3～ 4 粒，每天3 次。乳康片，由安康正大制藥有限公司提供，批號: 20050518，規格: 0. 35g × 24 片，用量: 一次3 片，一日3 次。
1. 2 動物大鼠，Wistar，雌性，清潔級，由河南省實驗動物中心提供，合格證號: 0001640。小鼠，昆明種，雌性，清潔級，由河北省實驗動物中心提供，合格證號: DK0509096。
1. 3 試劑硫化鈉，由天津市科密歐化學試劑開發中心提供，批號: 2003021-16，規格: 500g。
1. 4 儀器BZ-2000 微循環觀察系統，由成都泰盟電子有限公司提供。FA( N) /JA( N) 系列電子天平，由上海民橋精密儀器有限公司提供。YLS-6A 智能熱板儀，由山東省醫學科學院設備站提供。
1. 5 方法
1. 5. 1 乳絡通對熱板法致痛小鼠的影響取18 ～ 20g 的清潔級昆明種雌性小鼠，用智能熱板儀( 56℃) 測定它們的初始痛閾值，以小鼠舔后足跖為痛閾出現的指標，進行小鼠篩選標記。再取痛閾值在5 ～ 20S 的合格小鼠50 只，隨機分為5 組。分別灌胃高、中、低劑量的乳絡通混懸液( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 、乳康片混懸液( 0. 53g /kg) ，及同體積的生理鹽水。每天灌胃1 次，連續灌胃3 天，于最后一次灌胃30min 后，在同樣環境中分別測定它們30min， 60min， 90min， 120min 的痛閾值。
1. 5. 2 乳絡通對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響取20 ～ 22g的清潔級昆明種雌性小鼠50 只，隨機分為5 組，分別灌胃乳康片( 0. 53g /kg) ，乳絡通高、中、低( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 劑量和同體積的生理鹽水。每天灌胃1 次，連續給藥3 天，于最后一次灌藥1h 后，每鼠左耳滴二甲苯0. 04ml( 正反均滴) ，右耳作為對照，滴加二甲苯1h 后處死動物，取下雙耳，對齊，用0. 8cm 的打孔器打下雙耳耳片。迅速在分析天平上稱重，測腫脹度( 左耳與右耳的質量差) 。
1. 5. 3 乳絡通對大鼠棉球肉芽腫的影響取130 ～ 150g 清潔級Wistar 雌性大鼠50 只，隨機分為乳絡通高、中、低劑量( 0.60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) 組，乳康片組( 0. 53g /kg) 和空白對照組( 灌同體積的生理鹽水) 。實驗前禁食不禁水10h。取脫脂棉( 20 ± 0. 5 mg) 60 個，分別稱重，放入高壓滅菌鍋內滅菌1h，90℃烘箱干燥3h。干燥后再次稱重并記錄重量，放入干燥器內備用。麻醉大鼠，在無菌操作下埋入后大腿內側腋窩皮下。每天灌胃1 次，連續灌胃7 天，最后一次給藥1h 后，處死動物，剝離棉球肉芽腫。取出后60℃ 烘干24h，稱重，計算肉芽腫的重量。
1. 5. 4 乳絡通對小鼠耳廓微循環的影響取18 ～ 22g 的清潔級昆明種雌性小鼠50 只，隨機分為乳絡通高、中、低組( 0. 60g /kg、0. 30g /kg、0. 15g /kg) ，乳康片組( 0. 53g /kg) 和空白對照組( 灌同體積的生理鹽水) 。每天灌胃給藥1 次，連續灌胃5 天。實驗前每鼠右耳用8% 硫化鈉脫毛，再用溫水洗凈， 24h 后進行實驗。末次給藥30min 后，水合氯醛( 3% 0. 15m1 /10g) 腹腔注射麻醉。將小鼠固定在觀察臺上( 耳托上和耳廓表面滴加少許液體石蠟) ，用BZ-2000 型微循環顯微鏡和微循環測量分析系統觀察小鼠耳廓微循環情況。用微量注射器腹腔注射用生理鹽水稀釋( 1: 9) 的鹽酸腎上腺素注射液( 0. 6mg /kg) ，記錄注射前和注射后5、10、20min 小鼠微循環細靜脈、細動脈的管徑和血流速度變化情況。
2 結果
2. 1 乳絡通對熱板法致痛小鼠的影響知: 30min 時，乳康片組、高、中、低劑量乳絡通組的小鼠痛閾值提高較大，與空白對照組比較差別明顯。60min時，乳康片組、高、中、低劑量乳絡通組的小鼠痛閾提高值較大，與空白對照組比較差別顯著。90min 時，乳康片組、高、中、低劑量乳絡通組的小鼠痛閾值提高較大，與空白對照組比較差別顯著。120min 時，高、中劑量乳絡通組的小鼠痛閾值提高較大，與空白對照組比較差別明顯。
2. 2 乳絡通對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響由表2 可知: 乳康片組，高、中劑量乳絡通組對小鼠耳廓腫脹有顯著地抑制作用，低劑量乳絡通組對小鼠耳廓腫脹有明顯地抑制作用，與空白組比較，有明顯差異。
2. 3 乳絡通對大鼠棉球肉芽腫的影響由表3 可知: 乳康片、高、中劑量乳絡通組對大鼠棉球肉芽腫有顯著的抑制作用，低劑量乳絡通組對大鼠棉球肉芽腫有明顯地抑制作用，與空白對照組比較，有明顯差異。
2. 4 乳絡通對小鼠耳廓微循環的影響從表4 可知: 在5min 時，高、中劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環細靜脈管徑收縮較小，與空白對照組比較，差別明顯。而乳康片組和低劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環細靜脈管徑收縮較大，與空白對照組比較，無顯著差別。在10min 時，乳康片組、高、中劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環細靜脈管徑收縮較小，與空白對照組比較差別顯著; 而低劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環細靜脈管徑收縮明顯，與空白對照組比較無顯著差別。在20min 時，乳康片組、高、中劑量乳絡通組的耳廓微循環細靜脈管徑收縮較小，與空白對照組比較差別顯著( P < 0. 01) ; 而低劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環細靜脈管徑收縮明顯，與空白對照組比較無顯著性差別。從表5 可知: 5min 時，各組小鼠耳廓微循環細動脈管徑稍有收縮，無差異。在10min 時，乳康片組、高、中、低劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環細動脈管徑收縮較小，與空白對照組比較差別顯著。在20min 時，乳康片組、高、中、低劑量乳絡通組的'小鼠耳廓微循環細動脈管徑收縮較小，與空白對照組比較差別顯著。
與空白組比較，在5min 時，各組小鼠耳廓微循環血流速度有所減小，但無差別。在10min 時，乳康片組、高、中劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環血流速度減少值較小，與空白對照比較，差別顯著。在20min 時，乳康片組、高、中、低劑量乳絡通組的小鼠耳廓微循環血流速度減少值較小，與空白對照組比較，差別顯著。
3 討論
乳腺增生病是嚴重危害女性健康的一種常見疾病、多發病。中醫認為該病主要由情志不暢，思慮過度，導致肝失舒泄，氣機不暢，氣滯血瘀，或肝脾不和，痰氣凝滯而成。現代醫學認為乳腺增生是由性激素代謝紊亂，卵巢內分泌功能失調，雌激素相對或絕對過高而引起，其臨床特征為乳房脹痛、乳房腫塊，一般常于月經前期加重，行經后減輕。對于該病的治療，中醫治療原則是以疏肝解郁，理氣止痛，軟堅散結為主。
乳絡通主要有香附、丹參、柴胡、白芍、栝樓、路路通六味藥組成，具有理氣化淤、軟堅散結、消腫止痛的功效，在前期的研究中，我們復制了大、小鼠乳腺增生模型，觀察了其對乳腺增生的治療作用及其作用機制。為了更進一步驗證該藥的藥效，我們觀察其活血散瘀，消腫止痛的作用。
在本實驗中，我們采用熱板法、二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、大鼠棉球肉芽腫法及小鼠耳廓微循環法來觀察乳絡通的鎮痛、抗炎及改善微循環的作用。結果顯示乳絡通能提高小鼠痛閾值，減輕耳廓腫脹的程度，使大鼠棉球肉芽腫的重量減小，能對抗腎上腺素引起的微血管收縮，能擴張小鼠耳廓微動脈、微靜脈管徑，改善血液流態。通過本實驗的研究，乳絡通具有一定的鎮痛和抗炎作用。
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