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植物組織培養(yǎng)技術(shù)的研究進展論文

時間:2021-06-28 14:23:49 論文 我要投稿

植物組織培養(yǎng)技術(shù)的研究進展論文

  摘 要:植物組織培養(yǎng)技術(shù)作為一種科研手段,發(fā)展異常迅猛.從組織培養(yǎng)的原理、組織培養(yǎng)方法及培養(yǎng)過程中遇到的問題這3方面綜述了近5 a國內(nèi)植物組織培養(yǎng)的新研究。

植物組織培養(yǎng)技術(shù)的研究進展論文

  關(guān)鍵詞:植物組織培養(yǎng)技術(shù)論文

  引言

  植物組織培養(yǎng)是20世紀之初,以植物細胞全能性為理論基礎(chǔ)發(fā)展起來的一門新興技術(shù),是指在無菌條件下,將離體的植物器官、組織、細胞以及原生質(zhì)體,在人工配制的環(huán)境里培養(yǎng)成完整的植株,也稱離體培養(yǎng)或植物克隆。自1902年德國科學家Haberlandt提出植物細胞具有全能性理論, 到1934 年美國White 等用番茄根進行離體培養(yǎng)證實這一觀點以來,植物離體培養(yǎng)技術(shù)在基礎(chǔ)理論和應(yīng)用研究,已廣泛應(yīng)用到植物生理學、病理學、藥學、遺傳學、育種以及生物化學等各個研究領(lǐng)域, 成為生物學科中的重要研究技術(shù)和手段之一[1]。近年來,隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展,植物組織培養(yǎng)新方法和新技術(shù)不斷涌現(xiàn),研究重點也由器官、細胞水平向分子、基因方向轉(zhuǎn)移。21世紀,生物技術(shù)是最有生命力的一門學科,而植物組織培養(yǎng)作為一種基本的試驗技術(shù)和基礎(chǔ)的研究手段,被認為具有巨大的潛力。

  一、植物組織培養(yǎng)新技術(shù)的研究

  隨著科學技術(shù)的發(fā)展和對植物組織培養(yǎng)技術(shù)的不斷深入研究,一些新的培養(yǎng)方法和技術(shù)不斷出現(xiàn),為植物組織培養(yǎng)技術(shù)的不斷優(yōu)化和發(fā)展提供了新的途徑。

  1.新型光源的應(yīng)用。

  光是植物生長發(fā)育必不可少的重要因素之一,光照長短、光質(zhì)、光周期對植物的生長、形態(tài)建成、光合作用、新陳代謝以及基因表達均有調(diào)控作用。傳統(tǒng)的組織培養(yǎng)光源燈普遍存在壽命短、發(fā)熱量大且不均以及發(fā)光效率不理想等缺點。LED作為植物組織培養(yǎng)光源早在1991年就有栽培試驗。研究發(fā)現(xiàn), 光質(zhì)比例和光照強度可調(diào)的LED 光源比通常植物組織培養(yǎng)使用的熒光燈更能有效地促進試管苗的光合作用和生長發(fā)育。蔣要衛(wèi)利用LED作為大花蕙蘭組培苗光源的研究發(fā)現(xiàn), LED光源可以顯著改善大花惠蘭試管苗的生長狀況和提高其品質(zhì)[2]。日本的田中道男等運用陰極熒光燈( CCFL)作為文心蘭試管苗光源, 結(jié)果表明其地上部干、鮮重和試管苗的高度都有顯著提高。另外田中道男等利用SILHOS作為生菜組織培養(yǎng)光源, 獲得了高質(zhì)量的組織培養(yǎng)苗。目前LED是組織培養(yǎng)中最有效的人工照明光源,而CCFL等新型光源是未來發(fā)展的主要方向。

  2.開放組織培養(yǎng)技術(shù)。

  傳統(tǒng)的植物組織培養(yǎng)屬于嚴格的封閉式培養(yǎng),因而造成滅菌成本偏高、培養(yǎng)基易污染、外界環(huán)境調(diào)控難度大等缺點。而開放組織培養(yǎng)新技術(shù)是在外加抗菌劑的條件下,使植物組織培養(yǎng)脫離嚴格無菌的操作環(huán)境,在自然開放的有菌環(huán)境中進行,恰好彌補了這些不足。趙青華等采用開放式組培技術(shù),在培養(yǎng)基中添加抑菌劑,克服了非滅菌條件下魔芋組織培養(yǎng)污染問題,有效地簡化了實驗步驟,降低了生產(chǎn)成本[3]。何松林的.研究表明在添加抗菌劑的開放式組培中,文心蘭試管苗可正常生長[4]。開放式組織培養(yǎng)突破了封閉式培養(yǎng)的限制,從根本上簡化了組織培養(yǎng)環(huán)節(jié),使將來規(guī)模化開放式組織培養(yǎng)成為可能。

  3.光獨立培養(yǎng)技術(shù)。

  光獨立培養(yǎng)法又稱無糖培養(yǎng)法,是指利用CO2代替葡萄糖作為植物組織培養(yǎng)的碳源,人工控制組織培養(yǎng)苗生長所需的光、溫、水、氣、營養(yǎng)等條件,促使組織培養(yǎng)苗快速轉(zhuǎn)變?yōu)樽责B(yǎng)型的培養(yǎng)方式。一方面避免了由葡萄糖引起的雜菌污染;另一方面,增強了組織培養(yǎng)微環(huán)境的人工調(diào)控能力。屈云慧等以虎眼萬年青為對象的無糖培養(yǎng)研究表明萬年青再生芽的生根率高, 種苗質(zhì)量也優(yōu)于常規(guī)培養(yǎng)[5]。肖玉蘭、丁永前等設(shè)計的全套無糖組織培養(yǎng)設(shè)備培育出的苗具有抽葉多、植株健壯、節(jié)間距短、根系發(fā)達、干物重積累多、光合自養(yǎng)能力強等更優(yōu)良的生物學性狀。目前,無糖培養(yǎng)法還處于理論研究和應(yīng)用的開始階段,隨著理論研究的不斷深入及相關(guān)配套技術(shù)的不斷完善, 必將成為組織培養(yǎng)技術(shù)的一種重要手段。

  4.多因子綜合控制技術(shù)。

  近年來,隨著對植物組織培養(yǎng)機理的深入研究和交叉學科間的相互促進作用,多因子綜合控制的環(huán)境調(diào)控設(shè)施越來越多的應(yīng)用到實際生產(chǎn)中,大大降低了組織培養(yǎng)成本, 促進了組織培養(yǎng)苗商品化的進程。崔謹?shù)冗\用CO2 監(jiān)控系統(tǒng)對甘薯組培苗進行調(diào)控的結(jié)果表明, 在CO2監(jiān)控系統(tǒng)方式下培養(yǎng)的甘薯組培苗, 具有生長迅速、光合產(chǎn)物積累明顯、葉色深綠、根系發(fā)達等特點[6]。劉文科等設(shè)計了一種新型密閉式組培室, 并研制出一套用于該組培室的綜合環(huán)境控制系統(tǒng)[7]。李傳業(yè)等設(shè)計的一套能對組培箱內(nèi)CO2濃度、相對濕度進行調(diào)控的組織培養(yǎng)微環(huán)境控制系統(tǒng)試驗結(jié)果表明, 組織培養(yǎng)箱內(nèi)CO2摩爾分數(shù)和相對濕度達到了預(yù)期目標。

  二、植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用研究

  植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用主要理論基礎(chǔ)有兩方面。一是細胞全能性,植物修復(fù)與完善、快繁脫毒苗、育種、種子和種質(zhì)資源保存、植物檢疫等都是其發(fā)展和應(yīng)用的成果。二是懸浮培養(yǎng)液,主要應(yīng)用于植物次生代謝產(chǎn)物的提取。

  1.“全能性”的應(yīng)用。

  植物修復(fù)與完善是模擬植物組織培養(yǎng)過程中器官形成和細胞增殖形成的一套全新理論, 植物脫毒和離體快速繁殖是目前植物組織培養(yǎng)應(yīng)用最多、最有效的一個方面,因其快速、無毒的特點,已經(jīng)廣泛應(yīng)用于觀賞植物、園藝作物、經(jīng)濟林木、無性繁殖作物,并已形成產(chǎn)業(yè)化、商品化。植物組織培養(yǎng)技術(shù)為培育優(yōu)良作物品種開辟了新的途徑,利用該技術(shù),通過花藥和花粉培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)與細胞融合、細胞無性系變異、基因工程及突變體篩選等手段,已經(jīng)培育出一大批具有優(yōu)良性狀的植株。借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)保存種子和種質(zhì)資源,因其優(yōu)于常規(guī)方法的特殊性越來越受到重視,已在1000多種植物種和品種上得到應(yīng)用, 并取得很好的效果。

  2.愈傷組織或懸浮培養(yǎng)液的應(yīng)用。

  植物次生代謝物如蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿及其他活性化合物是許多醫(yī)藥、食品、香料、色素、農(nóng)藥和化工產(chǎn)品的重要原料, 其需求量逐年增加。目前,利用組織培養(yǎng)技術(shù)提取植物次生代謝產(chǎn)物因其高效率、高產(chǎn)量的優(yōu)勢已成為主流。用組織培養(yǎng)方法生產(chǎn)微生物以及人工不能合成的藥物或有效成分的研究, 正在不斷深入, 有些已投入工業(yè)化生產(chǎn),預(yù)計今后將有更大發(fā)展。

  三、展望

  植物組織培養(yǎng)技術(shù)不僅是植物生物學和生物化學領(lǐng)域研究的一個重要的工具,在分子生物學和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的研究中也具有重要意義。未來,一方面植物組織培養(yǎng)會借助更多的高新新技術(shù)向高效化、智能化、產(chǎn)業(yè)化方向發(fā)展。另一方面,在生產(chǎn)應(yīng)用上會不斷開辟新的領(lǐng)域。但是, 長期以來, 組織培養(yǎng)幾乎停留在試驗研究上, 在應(yīng)用生產(chǎn)方面仍有許多局限性。因此, 今后對植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用方面需要進一步研究, 以充分發(fā)揮它的應(yīng)用潛力。

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